沙保弱琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar,SDA)是一种广泛应用于真菌分离培养的选择性培养基,由法国微生物学家Raymond Sabouraud于19世纪末研发。其核心成分为葡萄糖(或麦芽糖)、蛋白胨和琼脂,pH值通常控制在5.6±0.2的酸性范围,这种环境能有效抑制细菌生长,同时促进真菌(如酵母菌、霉菌)的增殖。该培养基在临床微生物学、药品生产环境监测、食品卫生检验及科研领域中具有重要地位,尤其在皮肤癣菌、念珠菌等病原真菌的分离与鉴定中表现优异。
沙保弱琼脂培养基的质量检测主要包括以下项目:
1. 理化指标检测: - pH值:需符合5.4-5.8的标准范围; - 凝胶强度:确保培养基凝固性满足实验需求; - 水分含量:避免脱水或过度吸湿影响性能; - 外观检查:培养基颜色均一、无杂质或沉淀。
2. 微生物性能检测: - 促生长能力测试:验证对目标真菌(如白色念珠菌、黑曲霉)的支持性; - 抑制能力测试:确认对非目标细菌(如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)的抑制效果; - 无菌性检查:确保培养基本身无微生物污染。
1. 理化检测方法: - pH值测定:使用校准后的pH计直接测量溶解后培养基的酸碱度; - 凝胶强度测试:通过凝胶强度测定仪量化凝固能力; - 水分含量测定:采用干燥失重法或卡尔费休水分测定法。
2. 微生物检测方法: - 促生长实验:接种标准菌株(如ATCC提供的真菌菌种)至培养基,25-30℃培养5-7天,观察菌落形态和生长密度; - 抑制实验:接种革兰氏阳性/阴性细菌,37℃培养24-48小时,确认无明显菌落形成; - 无菌性验证:取未接种的培养基在相同条件下培养,检查是否出现杂菌污染。
沙保弱琼脂培养基的检测需遵循以下标准: - 国际标准:参考美国药典(USP)、欧洲药典(EP)中关于培养基的质量要求; - 国家标准:依据《中国药典》2020版“微生物检查用培养基适用性检查”规定; - 行业标准:ISO 11133:2014《微生物学培养基的制备、生产、储存及性能测试》。 理化指标中,pH值偏差需≤±0.2,凝胶强度应≥500 g/cm²;微生物测试要求目标真菌生长率达70%以上,细菌抑制率需≥90%方可判定合格。